抗体CMC关于菌种的运输、储存与复苏！

　　问：生物提供一系列常用菌种，那么，抗体CMC菌种以什么形态提供给客户更好呢？
　　答：一般菌种保存形态是甘油菌。但甘油保存菌容易污染，运输也不方便，因此，我们在给客户寄送菌种时，提倡寄送穿刺培养菌。因为穿刺菌在4℃下可保存数个月，并且不容易污染，便于运送。（注：夏天运输时一定要用冰盒冰袋）
　　问：如何制作穿刺菌？
　　答：制作穿刺菌时，可在1.5ml的Tube管中加入琼脂培养基（半固体），把菌体用牙签穿刺于琼脂培养基中，37℃ 培养一个晚上后便可使用。
　　问：客户收到穿刺菌后该如何储存？
　　答：如短期保存（1个月内），可直接置于4℃保存；如长期保存，建议从穿刺菌划线后，挑取单菌落，接种在液体培养基中，做成甘油菌，置于-80℃保存。如需备份，也需要重新制备甘油菌，-80℃保存。
　　问：如何做甘油菌？
　　从菌种平板挑取单菌落，接种至液体培养基（按需要加入抗生素）中，培养过夜或培养至对数中期，取适量菌液于小管中，加入终浓度为10%-20%的灭菌甘油，混匀后可直接置于-80℃保存。
　　问：如何从穿刺菌中复苏细菌？
　　答：穿刺菌来源于单菌落，建议客户收到穿刺菌后，请先在LB平板上划线，然后挑取一个新鲜的单菌落于LB液体培养基中进行培养即可。
　　具体操作如下：取一个干净的移液器枪头，沿着穿刺管中淡黄色的大肠杆菌生长线插入，来回反复操作几次，每次都轻微改变枪头的方向，以尽可能的增加枪头与菌的接触面。将沾了菌的枪头在的LB平板上划线。将平板置于37℃培养箱中过夜培养。次日从LB平板上挑取一个单菌落接种到LB液体培养基中，37℃摇床过夜培养。
　　注：如果是含有载体的穿刺菌，则需用含有相应抗生素（载体的抗性基因）的LB平板和液体培养基，复苏菌种后直接提质粒即可。