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灌流培养工艺体内转染之小鼠尾静脉注射技巧

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发表于 2024-2-24 17:19:51 | 显示全部楼层 |阅读模式
  1.小鼠的固定
  灌流培养工艺最好使用小鼠固定器,前部有气孔保证小鼠呼吸,后部可以将尾部拉出,不要让小鼠在固定器中有太多活动空间, 如空间较大,可加入一些填充物,防止小鼠在注射时乱动。
  2.尾静脉的准备
  可以将小鼠尾部在50℃左右温水浸浴2分钟,以扩张静脉。
  3.尾静脉的选择
  小鼠尾部有3条尾静脉。背部1天,两侧各1条。由于背部静脉较深,较细,一般选择侧面的2条。
  4.注射器的选择
  选择1-2ml注射器,针头采用4号或4.5号。 最好采用疫苗接种的一次性2ml注射器。注射器吸入药液后,应将空气推出,防止因空气进入静脉小鼠死亡。
  5.注射
  用75%酒精消毒鼠尾后,一般在尾部远端的1/3到1/2处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易,而且一旦注射不成功,可以有更多近端注射的余地。将欲注射的鼠尾用左手紧紧压在桌面上,右手进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,一旦进入,将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了。如果推液阻力较大,甚至注射处出现渗液,则说明不在静脉内,需要重新调整注射。
  6.注射成功的特点
  药液注射到静脉和非静脉的区别,注射到静脉的推液几乎没有阻力,可快速将液体推完,通常600ul可在10秒推完。如果注射到静脉以外,强行推液,阻力较大,注射处周围会出现露水样渗液,而且出针后,出血较少。并且由于药液瘀阻在尾部,导致血流不畅,尾部缺血,易导致尾部炎症和坏死。
  7.注射完成后创口处理
  用纱布按压针口,直到不出血为止,一般5-10分钟。这样有利于创口尽快恢复,以利于下次注射。

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